290 - Analisi proteomica di lacrime umane in pazienti affetti da occhio secco da iperevaporazione
Autore/i: P.Versura, P. Nanni, A. Bavelloni, C. Coslovi, G. Cioffi, M. Piazzi, A. Roda, E.C. Campos
Rivista: RIMeL - IJLaM, Vol. 5, N. 4, 2009 (MAF Servizi srl ed.)
Pagina/e: 290-7
Riassunto
Premessa. L’occhio secco da iperevaporazione è causato da instabilità del film lacrimale: la superficie oculare non più protetta sviluppa difetti epiteliali a vario grado di severità. Abbiamo analizzato alcune proteine che nelle lacrime umane contribuiscono alla distribuzione e stabilità del filmlacrimale. Metodi. 5 µl di lacrime non stimolate sono statiraccolti da 50 pazienti affetti da occhio secco iperevaporativo (EDE) e 15 soggetti normali di controllo. Le proteine lacrimali lisozima, lactoferrina, albumina sierica, lipocalina e lipofillina sonostate separate mediante elettroforesi SDS-PAGE,utilizzando Criterion 18% Bio-Rad gels e colorazione Brilliant Blu G (Sigma), analizzate mediante tecniche densitometriche vs standard di controllo. Le proteine sono state analizzate mediante separazione elettroforetica 2-DE, immunoblotting e identificate mediante LC ESI-Q-TOF MS/MS. I dati di spettrometria di massa sono statiprocessati e inseriti nel NCBI non-redundant protein database mediante software Mascot (MatrixScience, UK). I risultati sono stati statisticamente valutati mediante t-test per dati indipendenti e Mann-Whitney test per dati non appaiati (significatività p< 0,05).Risultati. A parte il lisozima (p=0,9) per tutte leproteine analizzate si è osservata variazione significativa di espressione tra pazienti e controlli;rispettivamente (dati espressi come % media ±SD) Lactoferrina: 8,96 ±3,86 vs 17,41 ±3,46p=0,001; Lipocalina: 7,35 ±1,95 vs 10,55 ±1,01p=0,002; Lipofillina: 3,18 ±1,36 vs 4,14 ±1,25p=0,01; Albumina sierica: 9,28 ±6,51 vs 3,49 ±2,35p=0,005. L’analisi proteomica ha confermato uncalo di espressione della lipocalina 1 e della lipofillina A nei pazienti ed ha inoltre evidenziato unadiversa espressione delle isoforme di lipocalina 1 presenti nei campioni dei pazienti rispetto ai controlli sani.Conclusioni. Nei pazienti il calo di lactoferrina è da riferirsi ad una compromissione funzionaledella ghiandola lacrimale principale mentre l’aumento di albumina sierica è espressione di un fenomeno essudativo causato da infiammazione. Ilcalo nei pazienti delle proteine lipofiliche Lipocalina 1 e Lipofillina A e la diversa espressionedelle isoforme presenti potrebbe rendere contodell’alterata distribuzione della componente lipidica del film nella malattia.