099 - Valutazione di 4 kit diagnostici per la ricerca degli anticorpi anti-nucleo su cellule HEp-2 e HEp-2000 con metodica di immunofluorescenza indiretta
Autore/i: Tonutti E, Picierno A, Visentini D, Butazzoni M, Molinaro P, Grimaldi E, Bizzaro N
Rivista: RIMeL - IJLaM, Vol. 3, N. 2, 2007 (MAF Servizi srl ed.)
Pagina/e: 99-105
Premessa. La diagnosi delle malattie autoimmuni sistemiche (MAIS) viene posta secondo criteri clinici e immunologici; tra quest’ultimi, un ruolo determinante hanno gli anticorpi anti-nucleo (ANA) la cui ricerca rappresenta la prima indagine di laboratorio nell’approccio diagnostico alle MAIS. Questo studio ha l’obiettivo di valutare le caratteristiche analitiche e di sensibilità diagnostica di quattro kit commerciali per la ricerca degli ANA in immunofluorescenza indiretta (IFI) su substrato di cellule HEp-2. Metodi. In 409 sieri (328 giunti consecutivamente nel nostro laboratorio per la ricerca degli ANA e 81 selezionati perché ANA e/o ENA positivi) sono stati ricercati gli ANA con 4 diversi test HEp-2 in IFI (Inova, Euroimmun, BioRad, ImmunoConcepts) e gli anticorpi anti-ENA e anti-dsDNA con metodi ELISA. Dei 4 kit ANA, sono state valutate le diverse procedure di analisi, le caratteristiche dei substrati, i pattern di fluorescenza e il titolo, e le positività per anti-ENA e anti-dsDNA. La sensibilità clinica di ciascun kit è stata calcolata su 78 sieri che appartenevano a pazienti con diagnosi di MAIS. Risultati. Le percentuali di positività degli ANA al titolo ≥1:40 sono state rispettivamente del 59% per Euroimmun e per Bio-Rad, del 58% per ImmunoConcepts e del 52% per Inova. 86 sieri sono risultati positivi alla ricerca di anticorpi anti-ENA (39 anti-SSA, 6 anti-SSB, 23 anti-SSA/SSB, 8 anti- RNP, 6 anti-Scl70, e 1 ciascuno anti-Sm, anti- RNP/Sm, SSA/Jo1 e Jo1) e 14 per anti-dsDNA con risultati comparabili tra i 4 kit. La differenza maggiore è stata osservata per l’anticorpo anti- SSA: dei 39 sieri con positività isolata per anti- SSA, 8 (20%) sono risultati ANA negativi con il kit Inova, 9 (23%) con il kit Euroimmun, 10 (26%) con Bio-Rad e 5 (13%) con ImmunoConcepts. In maniera analoga, nei 78 sieri di pazienti affetti da MAIS, la maggior parte dei risultati negativi si è registrata nei pazienti con sindrome di Sjögren anti-SSA positivi in cui il kit Inova è risultato negativo nel 9% dei casi, Euroimmun e Bio-Rad nel 10% e ImmunoConcepts nel 2.5%. Conclusioni. Le performance dei 4 kit ANA HEp- 2 sono risultate più che soddisfacenti e, considerando le difficoltà intrinseche al metodo di IFI, la comparazione ha dimostrato livelli di sensibilità analitica e diagnostica accettabili per tutti i metodi valutati. Il kit ImmunoConcepts ha fornito percentuali più elevate di sensibilità